瓊脂

復雜的水溶性多糖化合物

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顆粒瓊脂
顆粒瓊脂

顆粒瓊脂又稱顆粒培養基,是經特殊工藝加工而成的顆粒狀干燥培養基。顆粒瓊脂在水中有不結塊,易溶解的特點,經過造粒后,每個顆粒質量穩定,不會在運輸和貯存過程中造成分散不均勻,而使質量不穩定。

顆粒瓊脂基本參數

中文名稱顆粒瓊脂 中文別名顆粒培養基
外觀淡黃色顆粒 特性在水中不結塊,易溶解

顆粒瓊脂的優勢

1、溶解更快速,而且不會結塊

2、無粉塵產生,減少有毒成分的吸入,更加環保,符合生物安全

3、減少操作人員的過敏反應

4、減少粉塵對實驗室儀器設備和衣服的污染

5、不吸潮,更容易稱量

6、造粒后,每個顆粒質量穩定,不會在運輸和貯存過程中造成散不均勻,而使質量不穩定

7、袋裝顆粒培養基易于儲運,使用簡單、方便,從鋁箔袋一頭撕開,倒入容器內,加熱攪拌溶解,無需稱量培養基,簡化培養基的配制過程,提高了效率

顆粒瓊脂應用范圍

微生物培養基,可用于腸道致病菌的選擇性分離培養或是其他微生物培養。

顆粒瓊脂用法

稱取顆粒瓊脂 54.0g,加熱溶解于 1000ml ?純化水(或蒸餾水)中,分裝,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。

瓊脂(中國藥典)顆粒使用方法

1、沿鋁塑袋側邊缺口處撕開或用剪刀剪開封口,取出產氣包。

2、將產氣包立即放入裝有培養皿的2.5L厭氧培養袋中,并密封培養袋。此時產氣包將會吸收培養袋內的O2,并同時產生CO2。

3、一般情況下,在60分鐘內,氧氣被完全吸收,同時產生約20~21%的二氧化碳。

瓊脂(中國藥典)顆粒操作步驟

1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液

2、取25克樣品液加入225mlmEC肉湯或mTSB肉湯中,37℃增菌培養18-24小時

3、用3mm接種環取1環增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養基上,做2個平板

4、37℃培養18-24h,O157:H7菌顯紫色,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色,其它細菌顯黃色或無色

5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學試驗和全套生化試驗

SS瓊脂顆粒的應用

用途用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養。

質量控制和典型特征

沙門氏菌在37℃培養18-24小時后,無色透明菌落有或無黑色中心,志賀氏菌呈無色透明菌落。

培養塞pH 的初步調整

培養基各成分完全溶解后,應進行pH 的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的zui終pH ,保證培養基的質量。pH 調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。

培養基的過濾澄清

液體培養基必須絕對澄清,瓊脂培養基也應透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

培養基的分裝

培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/ 3 。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還雙用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時建議能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂抖面培養基時,分裝量應以能形成2 / 3 底層和1/ 3 斜面的量為恰當。分裝容器應予先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml 培養基于一小玻瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基最終pH之用。

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